雞毒支原體抗體檢測試劑盒

1 抗原預包被板條 1塊 7 終止液 6ml

2 酶結合物 12ml 8 陰性對照 800μl

3 10倍濃縮洗滌液 50ml 9 陽性對照 800μl

4 底物A液 6ml 10 血清稀釋 1塊

5 底物B液 6ml 11 封板膜 2張

6 樣本稀釋液 50ml 12 說明書 1份

 ?雞毒支原體抗體檢測試劑盒

檢測雞血清中的雞毒支原體抗體，用于評估養雞場雞毒支原體疫苗免疫狀況及感染雞的血清學輔助診斷。

需自備的設備及試劑

微量移液器： 0.5μl～10μl、10μl～100μl、100μl～1000μl。 一次性移液器吸頭。 量筒：500ml。 96孔板酶標儀。 蒸餾水或去離子水。 洗瓶或洗板機。

樣品制備

取動物全血，按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血。

洗滌液的準備

濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫，如有鹽結晶，搖動使結晶的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按1：101的體積比稀釋待檢血清（例如：200μl樣品稀釋液中加2μl待檢血清）。

注意：陰性和陽性對照不用稀釋。取每個樣品后都要更換吸頭，準確記錄每個樣品在板上的位置。每個樣品在加入到包被板微孔前應充分混勻。

注意事項

?雞毒支原體抗體檢測試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫，使用前應搖勻，使用后放回2～8℃。 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時應防止試劑污染。 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性，使用時應該注意防護。 TMB（底物B液）不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。 檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2～8℃)。 所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。 嚴格遵守操作說明可以獲得*的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。 血清稀釋板為一次性用品，不得重復使用；血清稀釋板的*容量為300μl/孔。

操作步驟

取預包被的檢測板（根據樣品*，可拆開分次使用），將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔，取陰性及陽性對照各100μl

分別加入反應孔中，空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）。

蓋上封板膜，置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl），靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。 每孔加酶結合物100μl，蓋上封板膜，置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液，洗滌3次, 方法同2。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl、再加底物B液50μl，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘。 每孔加終止液50μl，使反應終止，10分鐘內測定結果。

結果判定

以空白對照調零用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.6，陰性對照孔A450值必須小于0.15。如果試驗無效，試驗中的操作值得懷疑，試驗應重做，并仔細檢察各組分。

樣品A450值大于0.25+陰性對照孔均值，判為陽性；樣品A450值小于0.25+陰性對照孔均值，判為陰性；如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計算。

有效期

貯存方法： 2 - 8oC下貯存。

有效期： 12個月。

雞毒支原體（Mycoplasma Galliscepticum,MG）感染是雞呼吸道病的一種，主要引起慢性呼吸道病（Chronicrespiratory disease,CRD）,氣囊炎和竇炎。隨著養雞規模加大、飼養方式改變和飼養密度提高，該病發病率越來越高，主要影響雛雞生長、使成年雞產蛋減少，造成養雞業經濟上的重大損失，危害性日益突出。

雞毒支原體是支原體目，支原體科，支原體屬的一個致病種，主要傳播方式是雞與雞之間的水平接觸傳達室播，即隨呼吸道分泌物排出，通過飛沫和塵埃經呼吸道感染。另外垂直傳播也是其傳播的主要方式。有時也發生間接接觸傳播